Виды
На май 2017 года в род включают 29 видов:
|
|
Несколько видов, ранее относившихся к роду риккетсий, перенесены в другие роды: Neorickettsia, Orientia.
Врачи отмечают, что спирохеты, риккетсии, хламидии, актиномицеты и микоплазмы представляют собой уникальные группы микроорганизмов, каждая из которых обладает особыми характеристиками и механизмами патогенности. Спирохеты, например, имеют спиралевидную форму и способны к активному движению, что способствует их инвазии в ткани. Риккетсии, в свою очередь, являются внутриклеточными паразитами, что делает их трудными для диагностики и лечения. Хламидии также являются внутриклеточными, но отличаются от риккетсий своей структурной простотой и способностью вызывать хронические инфекции. Актиномицеты, обладая свойствами как бактерий, так и грибов, играют важную роль в экосистемах, но могут вызывать заболевания у человека. Микоплазмы, не имея клеточной стенки, делают себя устойчивыми к многим антибиотикам, что создает сложности в терапии инфекций, вызванных этими микроорганизмами. Врачи подчеркивают важность понимания этих особенностей для эффективной диагностики и лечения инфекционных заболеваний.
Формы бактерий
При всем многообразии бактерий выделяют три основных формы: сферические, палочковидные и извитые.
Сферическая
Сферической формой обладают кокки. По тому, как располагаются клетки, разделяют на такие группы:
- микрококки (маленькие) – каждая клетка отдельно;
- диплококки (два) после деления клетки существуют парами;
- стрептококки (цепочка) после деления образуют цепочку;
- сарцины (связка) после деления образуют связку в трех направлениях;
- стафилококки (гроздь) делятся во всех направлениях, образуя гроздь.
Спирохеты, риккетсии, хламидии, актиномицеты и микоплазмы представляют собой уникальные группы микроорганизмов, каждая из которых обладает особыми характеристиками. Спирохеты, например, имеют спиралевидную форму и способны к движению благодаря своим флагеллам, что позволяет им эффективно колонизировать различные среды. Риккетсии, в свою очередь, являются внутриклеточными паразитами, что делает их трудными для изучения, но их роль в передаче заболеваний, таких как тиф, хорошо известна. Хламидии также являются внутриклеточными организмами и вызывают множество инфекций, включая заболевания половой системы. Актиномицеты, обладая грибоподобной структурой, играют важную роль в разложении органических веществ в почве. Микоплазмы, лишенные клеточной стенки, отличаются гибкостью и могут вызывать различные заболевания у человека и животных. Эти микроорганизмы демонстрируют удивительное разнообразие форм и функций, что делает их предметом активных исследований в микробиологии.
Палочковидные
Палочковидные делят на группы в зависимости от формы (правильная или неправильная), от размеров и по тому, как располагаются клетки. Расположение клеток под микроскопом выглядит хаотично, потому что после деления каждая клетка живет отдельно.
Их делят на такие группы:
- Риккетсии. Внутриклеточные паразиты очень малых размеров (до 2,0 мкм). Их владельцами чаще всего являются клещи, блохи и вши, сами разносящие инфекцию. В зависимости от условий существования они обладают свойством изменять форму и размер.
- Хламидии. Являются строгими (облигатными) грамотрицательными бактериями. Их относят к клеточным паразитам, имеющим свойство размножаться только внутри клетки. За пределами клетки они имеют округлую форму и неактивны.
- Микоплазмы. Эта группа не имеет клеточной стенки и существует в различных формах.
Извитые
Виды, имеющие извитую форму, разделяют по количеству оборотов и по характеру витков. Вибрионы имеют слегка изогнутый вид, спириллы – несколько завитков правильной формы, спирохеты – большое количество мелких завитков.
Описание и морфология
Морфология риккетсий достаточно разнообразна, так как они относятся к плеоморфным бактериям – микроорганизмам, обладающим морфологической изменчивостью. Внешние условия способны оказывать большое влияние не только на размеры, но и на форму бактерий.
При благоприятных условиях риккетсии соизмеримы с крупными вирусами и имеют характерную палочкообразную форму (например, риккетсии Бернета) с размерами:
- ширина в среднем 0,5 мкм;
- длина от 0,4 до 2,0 мкм.
Микроорганизм умеет менять форму в зависимости от условий окружающей среды
При наступлении неблагоприятных условий микробы могут изменять форму на кокки, нитевидные или клетки неправильного вида.
Строение клетки риккетсий соответствует нормам клеточного строения типичных прокариотов. В ней присутствует клеточная оболочка, протоплазма, ядерный материал. Как и все микробы, риккетсия не имеет ядра, а содержит ДНК, рибосомы и РНК. Наличие спор и капсул у этих бактерий не выявлено.
Нехарактерным для грамположительных, но типичным для грамотрицательных микроорганизмов принято считать наличие у бактерий (например, Rickettsia conorii) трехслойной мембраны и поверхностного микрокапсулярного слоя.
Характерная окраска – общая характеристика патогенных риккетсий:
- окрашивание по Граму отрицательное;
- окраска по Здродовскому насыщенно окрашивает микробы в рубиновый цвет, что позволяет легко их обнаружить на фоне синего клеточного ядра или голубой цитоплазмы;
- по Романовскому-Гимзе микроорганизмы окрашиваются в сиреневый цвет.
Исследования при помощи электронного микроскопа позволили выявить у некоторых видов рода Rickettsia волосовидные фимбрии (ворсинки на поверхности клетки), роль которых в физиологии этих микроорганизмов не выяснена.
Ученые достаточно изучили эту бактерию, но впереди еще много открытий
Для морфологии и ультраструктуры риккетсий характерны ряд особенностей, отличающие их от других прокариотов:
- Клеточные стенки имеют капсулообразный слизистый покров.
- Наличие в значительном количестве ненасыщенных жирных кислот в составе мембраны, что нехарактерно для бактерий.
- В состав нуклеоида входит кольцевая хромосома.
- Хотя все риккетсии – внутриклеточные паразиты (ни о каком симбиозе или мутуализме нет и речи), их метаболизм независим от обменных процессов, протекающих в клетке-хозяине.
- Способность к индукции фагоцитоза посредством клеток эукариотов.
- Клетки бактерий обладают адгезивными свойствами, что способствует их креплению и колонизации чужого организма.
- Источником энергии для микробов является глутамат.
Жизненный цикл
Жизненный цикл риккетсий имеет две стадии — вегетативную и покоящуюся. В вегетативной стадии микроорганизмы представлены палочковидными, бинарно делящимися и подвижными клетками.
Покоящиеся формы риккетсий — сферические и неподвижные клетки, располагающиеся в клетках членистоногих и теплокровных.
Репродукция, за исключением одного вида, происходит только в живых клетках, то есть, как и вирусы, риккетсии являются облигатными внутриклеточными паразитами, рост и размножение которых происходят в клетках подходящего хозяина. Паразитируют в цитоплазме и ядре или только в цитоплазме клеток членистоногих и теплокровных животных.
Устойчивость риккетсий к внешней среде
Риккетсии являются малоустойчивыми к разным условиям окружающей среды: при нагревании до 50°С они погибают уже спустя 10 минут, а до 80°С — спустя 1 минуту. К воздействию низких температур они являются более устойчивыми, что способствует сохранению своей жизнеспособности и вирулентности при температурах от -20 до -80°С целых несколько месяцев.
Клетки риккетсий могут жить лишь в клетках организма, даже в высушенных насекомых или фекалиях их можно обнаружить спустя несколько месяцев, однако при помещении в водный раствор клетки бактерий гибнут уже спустя 2,5—6 часа. Большинство риккетсий являются чувствительными к антибиотическим веществам широкого действия, в особенности к тетрациклиновому ряду.
Диагностика риккетсиозов
Симптомы риккетсиозов на ранних стадиях болезни слабо выражены. Только по прошествии нескольких дней можно заметить увеличение температуры, возникновение сыпи на коже и чувства слабости. Поэтому в диагностике риккетсиозов необходимы лабораторные исследования для выявления данных микроорганизмов при проведении специализированных посевов крови или при анализе образцов ткани. Эти бактерии можно увидеть под микроскопом при проведении специализированного окрашивания их клеток. Помимо этого, для диагностирования можно использовать метод обнаружения антител в крови.
Рис. 8. Диагностика риккетсиозов.
Биохимическая активность
Биохимическая активность риккетсий не выявлена. Реакция агглютинации риккетсий представляет собой специфическое взаимодействие агглютининов (антител) с целой клеткой, с образованием осадка (агглютината). Данная реакция применяется при серологическом методе исследования инфекционных болезней, а также при определении антигенной структуры микроба.
У бактерий выявлено два антигена:
- термостабильный групповой;
- термолабильный специфический.
Реакция пассивной гемагглютинации (непрямой РНГА), с использованием сухого антигена из риккетсий Провачека, является более чувствительной – в ней используют фиксацию антител на обработанных формалином эритроцитах.
В группу Rickettsia входит множество видов бактерий
Первым тестом при серодиагностике риккетсиозов была реакция агглютинации с протеями (Вейля-Феликса), исключение составляет лихорадка Скалистых гор, вызванная Rickettsia rickettsia.
Бактериальным токсином риккетсий является термолабильный эндотоксин. Ферментативные и биохимические свойства бактерий рода Rickettsia не выражены.
Эпидемиология
У человека риккетсии вызывают острые лихорадочные заболевания — риккетсиозы. Наибольшее значение имеют возбудители эпидемического сыпного тифа (Rickettsia prowazekii), клещевого риккетсиоза (Rickettsia sibirica), пятнистой лихорадки Скалистых гор (Rickettsia rickettsii).
Патогенные для человека риккетсии, за редким исключением, передаются при укусе заражённых вшей, клещей и блох. Заражение риккетсиями иногда вызывает гибель самих членистоногих-переносчиков, но может и не оказывать заметного патогенного действия на них. В некоторых случаях передача риккетсий у членистоногих происходит от одного поколения к другому через заражённые яйца, в других — через промежуточных хозяев, таких, как крысы, мыши или собаки. У этих млекопитающих носительство риккетсий не сопровождается выраженными признаками заболевания, и потому считается, что инфекция протекает у них в латентной (скрытой) форме. В случае сыпного тифа человек сам иногда служит резервуаром инфекции; она может оставаться латентной, но в соответствующих «благоприятных» условиях проявляется и, распространяясь, приобретает характер эпидемии.
Единственное известное заболевание млекопитающих, связанное с риккетсиями, — клещевая лихорадка овец, коз и крупного рогатого скота — встречается только в Африке.
В мазках риккетсии располагаются одиночно, короткими цепочками или в виде отдельных нитей. Риккетсии не растут на питательных средах; для их культивирования используют куриные эмбрионы, фибробласты куриных эмбрионов и культуры клеток млекопитающих.
Для дифференцирования различных видов риккетсии учитывают способность размножаться в цитоплазме и/или в ядрах клеток.
Группоспецифические антигены риккетсии — ЛПС клеточной стенки, проявляющие свойства эндотоксинов. Э. Вейль и А.Феликс (1916) установили интересную особенность — сходство антигенов риккетсии с антигенами неподвижных (ОХ-) штаммов и способность сыворотки больных риккетсиозами перекрёстно агглютинировать штаммы ОХ19, ОХ2 и OXK P. vulgaris.
С этого момента способность сывороточных агглютининов больных риккетсиозами перекрёстно реагировать с различными ОХ-штаммами P. vulgaris используют для дифференцирования различных видов риккетсии под названием реакции Вейля-Феликса.
Строение клетки бактерий
Ультраструктура клетки изучается при помощи таких микроскопических методов:
- светового;
- люминесцентного;
- сухого (когда между объективом и линзой есть воздух);
- фазово-контрастного;
- темнопольного.
- интерференционного;
- электронного.
Ультраструктура бактериальной клетки считается показателем ее уникальности в организационных процессах.
Нуклеоид
Нуклеоид является прототипом ядра и не содержит таких структур, свойственных эукариотам, как ядрышки, ядерная оболочка и гистоны. Он обладает свойством хранения и передачи генной информации, содержащейся в одной хромосоме, имеющей вид замкнутого кольца. Еще носителями наследственной информации бактериальной клетки являются плазмиды.
Цитоплазма
Цитоплазм представляет собой сложную систему, включающую в себя такие включения:
- рибосомы (отвечают за синтез белков);
- гранулы (содержат гликоген, полисахариды);
- волютин (полифосфаты);
- плазмиды (обладают свойством повышать устойчивость клетки).
Цитоплазматическая мембрана
Под электронным микроскопом хорошо видно, что мембрана бактериальной клетки состоит из трех слоев. При росте клетки она имеет свойство образовывать своеобразные выпячивания ─ мезосомы. В жизни клетки она выполняет такие функции:
- барьерную;
- энергетическую;
- транспортную.
Капсула
Капсула является слизистой структурой с четко выраженными границами, хорошо различаемыми под микроскопом. Ее изучают с помощью окрашивания мазка, где краска вокруг нее создает темный фон. Она обладает защитными свойствами против фагоцитоза бактерий и реагирует на антитела.
Клеточная стенка
Клеточная стенка защищает бактериальную клетку и обеспечивает ее постоянную форму. Состоит из двух слоев: внешнего, обладающего свойством пластичности, и внутреннего, постоянного. Такое свойство клеточной стенки, как ее реакция на окрашивание, используется для определения видов.
Жгутики
Жгутики ─ это тонкие нити, обеспечивающие подвижность клетки микроорганизма и имеющие длину большую, чем она сама. Жгутики имеют белковую структуру, их число может колебаться от одного до тысяч. Морфология расположения у них разнообразна: от прикрепления к одному концу до прикрепления по всей поверхности.
Пили
Пили являются ворсинками, которые состоят из белкового вещества. Они выполняют такие функции:
- прикрепление к поражаемой клетке;
- несут ответственность за питание;
- размножение;
- водно-солевой обмен;
- конъюгация (сближение).
Споры
При неблагоприятных условиях роста и развития микробы образуют споры, способствующие сохранению вида и не являющиеся продолжением рода. Наличие многослойной оболочки и вялотекущих метаболических процессов позволяет спорам долгое время находиться в стадии спокойствия и ждать подходящих условий для развития.
Появление современных методов исследования привело к новому витку в изучении царства бактерий. Ежегодно микробиологи с помощью новых методик изучают морфологию и свойства новых, еще неизученных видов микроорганизмов, неподходящих ни под один тип классификации.
Культивирование
В связи с паразитарной природой культивирование риккетсий, которые способны к росту исключительно внутри живой клетки, осуществляют на следующих препаратах:
- различных тканях;
- живых лабораторных животных;
- курином эмбрионе.
Особенности культивирования риккетсий связаны с тем, что микроорганизмы – облигатные паразиты, не осуществляют рост ни на каких бесклеточных питательных средах.
- Выращивание микроорганизмов с использованием методов культивирования осуществляют на переживающих (временно сохранена клеточная жизнеспособность) материалах. Они представляют собой мелкодисперсную взвесь тканей или частей органов в солевом (возможно, в питательном) растворе.
- Хорошо показал себя метод выращивания микробов на двенадцатидневном курином эмбрионе, с поддержанием температурного оптимума роста (37°С) в течение шести дней. Метод прекрасно зарекомендовал себя для приготовления диагностических препаратов и получения вакцин из риккетсий.
- Успешно культивируют микробы в организме живых белых мышей – наибольшее количество бактерий собирается в легких грызунов.
- Микроорганизмы культивируют, инфицируя вшей дисперсной взвесью активных микробов (метод Вейгля-Мосинга), а также выращивают на их личинках (Пшеничнов-Райхер).
Лечение
Лечением риккетсиозов занимаются инфекционисты. Оно заключается в проведении этиотропной, симптоматической и патогенетической терапии.
- Противомикробные препараты — основа в лечении патологии. Больным назначают антибиотики из группы тетрациклинов «Тетрациклин», «Доксициклин», фторхинолонов «Офлоксацин», «Ципрофлоксацин», макролидов «Азитромицин», «Клацид», а также «Хлорамфеникол».
- Симптоматическое лечение – жаропонижающие средства «Аспирин», «Парацетамол», противовоспалительные препараты «Преднизолон», «Дексаметазон». Сердечные гликозиды назначают при появлении признаков сердечной дисфункции.
- Дезинтоксикационное лечение — инфузионное внутривенное введение солевых растворов, «Гемодеза», глюкозы; обильное питье, прием «Оралита», «Регидрона».
- Десенсибилизация – «Супрастин», «Лоратадин», «Тавегил».
- Местное лечение – обработка образовавшегося на коже струпа и удаление отмерших тканей.
Микробиологическая диагностика
Лабораторная диагностика различных инфекций, вызванных риккетсиями, основывается на выделении возбудителя. Наиболее эффективны исследования будут в острый период, до начала приема антибиотиков.
Патогенные риккетсии, вызвавшие заболевание, исследуют методами лабораторной диагностики. Используют несколько методов:
- серологические (РНГА, РСК, ИФА и другие);
- культуральные;
- молекулярно-генетические (ПЦР, изучение нуклеотидных последовательностей генов).
В результате исследования образцов в мазке может быть поставлен правильный диагноз, позволяющий исключить наличие других риккетсиозов и назначить правильное лечение.
Своевременная диагностика заболевания важна для эффективного лечения
Возможность изучать столь мелкие бактерии, как риккетсии, возникла только с появлением электронного микроскопа. История изучения этих микроорганизмов только начинается, и микробиологи открывают новые виды и новые свойства.
Этиология
Риккетсии — микроорганизмы, имеющие разнообразную форму: кокковидную, палочковидную, нитевидную. Чаще всего они представляют собой мелкие, короткие палочки, не имеющие жгутиков и капсулы. Их форма и размеры могут изменяться в зависимости от фазы роста. При изменении определенных условий они легко образуют клетки неправильной формы.
Для определения типового вида бактерий изучают морфологию клеток, особенности размножения в желточных мешках куриных эмбрионов, воспроизводят экспериментально инфекционный процесс на лабораторных животных, проводят серологический анализ антигенной структуры.
-
Морфология. Снаружи клетка имеет микрокапсулярный слой, на котором располагается риккетсиозный антиген. Под ним находится мембрана клеточной стенки и цитоплазма. Клеточная оболочка напоминает по химическому составу клеточную стенку бактерий. В цитоплазме располагается нуклеоид, рибосомы, РНК, ДНК. На поверхности риккетсий имеются фимбрии, с наличием которых связана их подвижность.
- Тинкториальные свойства. По Грамму микробы окрашиваются в красный цвет. При окраске карболовым фуксином риккетсии становятся розовыми или малиновыми. Риккетсии плохо воспринимают анилиновые красители. Обычно для микроскопического исследования используют метод Романовского-Гимзе.
- Физиология. Благодаря особенностям метаболизма риккетсии приспособились к внутриклеточному существованию и утратили способность к жизнедеятельности вне клетки. Риккетсии свободно размножаются в цитоплазме эукариотической клетки без окружения паразитофорной вакуолью. Вне клеток хозяина культивирование микробов невозможно. Они не растут на искусственных питательных средах. В естественным условиях бактерии обитают в живом организме позвоночных и членистоногих, а в лабораторных — в эпидермальных клетках желточного мешка куриного эмбриона, в легочной ткани белых мышек или в культуре живых клеток, культивируемых in vitro. Температурный оптимум роста 32-35°С. Риккетсии медленно растут и размножаются бинарным делением в течение 8-9 часов. Риккетсии имеют ограниченную ферментативную активность, независимую от клетки-хозяина. Они токсичны и гемолитически активны.
- Устойчивость. Риккетсии не устойчивы во внешней среде. Они быстро погибают при нагревании и под воздействием дезинфектантов, спирта, эфира, хлороформа. Высушивание и гипотермию микробы переносят относительно легко.
- Патогенность. Патогенные свойства риккетсий обусловлены их способностью к пенетрации чувствительной клетки, где они размножаются и продуцируют токсин. Своеобразный термолабильный токсин не секретируется во внешнюю среду и не взывает интоксикацию после гибели возбудителя. Эндотоксин оказывает вазопаралитическое действие, вызывает значительные нарушения ЦНС и расстройства кровообращения. Почти все виды рода Rickettsia патогенны для человека. Микробы обладают тропизмом к клеткам эндотелия сосудов кишечника основных своих хозяев — насекомых. У человека они поражают практически все органы и ткани. При этом клетки, зараженные паразитом, быстро разрушаются.
- Антигенные свойства. Антигенная активность обусловлена растворимым группоспецифическим и корпускулярным видоспецифическим антигенами. Они являются иммуногенными и протективными.
Жизненный цикл данных микроорганизмов очень прост. Они могут существовать в двух основных формах — вегетативной и покоящейся. В вегетативной стадии микробы имеют форму палочек, являются подвижными и быстро делятся пополам. Покоящиеся формы — сферические и неподвижные клетки, располагающиеся в клетках членистоногих и теплокровных. Зачастую такие формы могут находиться в организме до 10 лет, сохраняясь и при благоприятных условиях снова активируясь.
Методы изучения бактерий
Для изучения морфологии бактерий применяют такие методы, как микроскопия и окрашивание. Наблюдение за живыми бактериями происходит с помощью световых и электронных микроскопов в неокрашенных препаратах. Для получения полной характеристики рассматриваемых бактерий применяют такие методы изучения:
- Морфологический. Под микроскопом рассматривают морфологию бактерии, ее подвижность, споры и способы размножения.
- Культуральный. Исследование бактерии в питательных средах. Изучают ее рост, величину, цвет колонии и скорость размножения.
- Физиологический. Рассматривают такие свойства бактерий, как реакция на температуру, на внешние раздражители, на кислород, их способность к сбраживанию, реагирование на различные среды.
Применение этих способов изучения позволяет установить вид микроорганизма и морфологию каждого из них. Это сложный и длительный процесс, занимающий много времени.
Способ окрашивания является наиболее точным и эффективным в распознании и изучении строения бактерий под микроскопом. Зачастую микробы в своей естественной среде невидны под микроскопом, а окрашивание позволяет не только изучить морфологию бактерии, а и правильно определить ее вид. Многие бактерии имеют одинаковую морфологию, но при окрашивании дают разные цвета. Для изучения бактерий применяют такие способы окрашивания:
- Простой. Применяют одну краску: фуксин либо метиленовую синюю.
- Сложный. Этот способ чаще всего применяется для выявления возбудителя инфекции, включает в себя два и более красителя. Чаще на практике применяют метод окрашивания по Граму и по Цилю.
- Дифференцированный. Для окрашивания жгутиков используют метод Бениньетти. Для индицирования капсул применяют метод Гинса.
Профилактика
Иммунизация рекомендована лицам, которые планируют свой отдых в странах, где есть очаги инфекции.
Простые правила, позволяющие обезопасить себя от болезнетворных микробов и избежать развития патологии:
- Ношение одежды с длинным рукавом и шляпы с широкими полями в парках, скверах, лесах, зоопарках и других местах, где возможен контакт с кровососущими насекомыми,
- Использование репеллентов,
- Осмотр своего тела на предмет укусов,
- Борьба с клещами, вшами, блохами,
- Уничтожение мышей и крыс в канализации, на свалках и подвалах,
- Соблюдение правил личной гигиены.
Экстренная профилактика проводится при укусах клещей. Для этого используют «Доксициклин» или «Азитромицин». Больные риккетсиозом подлежат строгой изоляции. За контактировавшими с пациентом лицами устанавливается наблюдение. В очаге инфекции проводится санитарная обработка.
Риккетсиозы — большая группа заболеваний, которые имеют неоднозначный прогноз. Если лечение было начато своевременно и проводилось правильно, большинство недугов заканчивается выздоровлением. Тяжелые формы сыпного тифа и некоторых лихорадок с трудом поддаются терапии даже самыми сильным антибиотиками и могут привести к смерти больного.
Передача инфекции в человеческий организм происходит по трансмиссивному пути. Попадая в организм, патогенные риккетсии вызывают протекающие в тяжелой форме риккетсиозы.
В истории человечества переоценить значение риккетсиозов невозможно. Только от сыпного тифа, возбудителем которого является R. prowazekii, человечество страдало многие века, а число жертв исчислялось миллионами. Во время военных действий эпидемия тифа (его еще называли военной лихорадкой) зачастую оказывала решающее влияние на исход военных действий.
У больных тифом быстро развивалось недомогание и поднималась высокая температура с ознобом и тошнотой. При проявлении лихорадки платяная вошь сразу покидает хозяина и переходит к другому – таким образом переносчик разносит инфекцию.
Типичным представителем трансмиссивного пути передачи инфекции посредством инокуляции (заражение здорового человека при укусе инфицированным насекомым) является марсельская лихорадка. Марсельская, или средиземноморская, лихорадка (возбудитель Rickettsia conorii) является острым зоонозным риккетсиозом. Переносчиком инфекции является собачий клещ, резервуаром считают собак, шакалов, различных грызунов и ежей.
Марсельская лихорадка характеризуется спорадическим (случайным) и ярко выраженным сезонным характером (май-октябрь). Географически марсельская лихорадка отмечалась на Черноморском побережье, в Средиземноморье и Индии. В Астраханской области отмечается астраханская риккетсиозная лихорадка, которую считают подвидом марсельской.
Бактерии в организме клеща способны сохраняться долго – 1,5 года. Кусая животных, клещи выделяют бактерии со слюной и с фекалиями.
Окрашивание и культивирование
Риккетсии культивируются в желточных мешках куриных эмбрионов, перевиваемых культурах клеток, легких белых мышей.
Невозможность культивирования риккетсий обычными микробиологическими методами составляла основную трудность для создания вакцины против сыпного тифа.
Эффективные методы культивирования риккетсий в лабораторных условиях вне организма-«хозяина» разработал основатель Пермской школы микробиологии Алексей Васильевич Пшеничнов. Он разработал оригинальный метод заражения кровососущих насекомых на эпидермомембранах для культивирования риккетсий, метод питания кровососущих насекомых дефибринированной кровью через плёнку эпидермиса с целью поддержания их жизнедеятельности или заражения риккетсиями в лабораторных условиях. Разработал среду КЖМ (кровь-желток-молоко) для выращивания риккетсий in vitro. Новые методы культивирования помогли А. В. Пшеничнову в 1942 году создать эффективную вакцину для профилактики сыпного тифа. Широкое применение вакцины позволило предотвратить эпидемию тифа в действующей армии и в тылу во время Великой Отечественной войны.
Риккетсий идентифицируют в мазках при окраске по Романовскому—Гимзе, Хименесу, Маккиавелло, Здродовскому, в мазках, обработанных флюоресцирующими и энзим-мечеными антителами. Для первичного выделения риккетсий используют преимущественно взрослых самцов морских свинок и взрослых белых, линейных и бестимусных мышей.
Риккетсии
Риккетсии – мелкие (0,35-1.0 мкм) грамотрицательные, полиморфные бактерии, являющиеся облигатными внутриклеточными паразитами. Риккетсии разнообразны по форме и выделяют следующие типы:
- кокковидные однозернистые (до 0,5 мкм);
- палочковидные двухзернистые (1-1,5 мкм);
- бациллярные трех-четырехзернистые (3-4 мкм);
- нитевидные многозернистые (10-40 мкм).
Зерна (нуклеопротеиды) обнаруживаются при окраске по Романовскому-Гимзе. Все формы взаимообратимы. Структурно имеют все компоненты бактериальной клетки: клеточную стенку, липоидную капсулу, цитоплазму, нуклеоид, рибосомы, пили. Риккетсии содержат как ДНК, так и РНК, обладают высоким содержанием фосфолипидов, содержание углеводов невелико. В большинстве случаев (кроме вида Rochalimaea guintana) на искусственных питательных средах риккетсии не растут. Жизненный цикл риккетсий зависит от жизнедеятельности клетки-хозяина и складывается из двух стадий: вегетативной и покоящейся (элементарные тельца). Риккетсии, находящиеся в вегетативной стадии (рис. 23) активно размножаются путем бинарного деления и обладают активной подвижностью, по-видимому, обусловленной жгутиковыми структурами. Риккетсии покоящейся стадии (элементарные тельца) имеют сферическую форму и они не активны. Риккетсии способны к биосинтезу белка, но не могут самостоятельно получать макроэргические соединения, поэтому их можно назвать «энергетическими паразитами» клеток-эукариотов. В связи с этим, для культивирования риккетсий обычно заражают куриные эмбрионы в желточный мешок (метод Кокса), культуры клеток, в которых некоторые виды риккетсий образуют, как и вирусы, тельца включений. Реже заражают чувствительных лабораторных животных: морских свинок, белых мышей. Порядок Rickettsiales включает виды патогенные для теплокровных животных и человека, переносчиками служат вши, блохи, клещи. Заболевания называются риккетсиозами. Большинство болезнетворных для человека видов риккетсий входит в состав семейства Rickettsiaceae, роды Rickettsia, Rochalimaea, Coxiella, вызывая эпидемический сыпной тиф (Rickettsia prowazekii), Ку-лихорадку (Coxiella burnetti), волынскую лихорадку (Rochalimaea guintana), лихорадку цуцугамуши (Rickettsia tsutsugamushi) и другие. Паразитирующие виды ассоциированы с ретикулоэндотелиальными клетками и клетками эндотелия сосудов или эритроцитами.
- Рис. 23. Rickettsia prowazekii в культуре ткани: а – видны отчетливо внутренний слой (вкс) и наружный слой (нкс) клеточной стенки, представленной трехслойной мембраной, цитоплазматическая мембрана (цм) и ядерное вещество (н); б – видны микрокапсула (мк), клеточная стенка (кс) и перетяжка (п), делящая клетку как у большинства грамотрицательных бактерий. х 72 000, х 108 000 соответственно (Авакян А.А., Кач Л.Н., Павлова И.Б., 1972)
Методы исследования. Риккетсии хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе в сиреневый цвет, по Морозову (методом серебрения) в черный цвет. NB! Для дифференциации риккетсий применяется метод окраски, предложенный П.Ф. Здродовским:
- Тонкие фиксированные мазки окрашиваются водным карболфуксином (из расчета 10 капель карболового фуксина Циля на 10 мл фосфатного буфера рН – 7,4) в течение 5 мин.
- Мазок промывают водой и обрабатывают 0,5% раствором лимонной кислоты (1-3 сек).
- Хорошо промывают водой и докрашивают 10 сек, 0,5% водным раствором метиленового синего.
- Промывают водой и высушивают.
Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет и легко обнаруживаются на фоне голубой цитоплазмы и синего ядра клеток.
- Вперёд >
Вопрос-ответ
Каковы особенности строения актиномицетов?
Для актиномицетов характерно образование друз – плотных “зерен” в гное, представляющих собой беспорядочно переплетенные в центре нити мицелия с радиально отходящими на периферию колбовидно расширенными на концах “дубинками”.
Чем характеризуются спирохеты?
Все спирохеты – прокариоты (безъядерные одноклеточные), подвижны, грамотрицательны, размножаются поперечным делением и содержат эндотоксины. Эндоспор не образуют, но некоторые представители образуют цисты, зёрна. Встречаются как аэробные виды, так и анаэробные и факультативно-анаэробные.
Каким методом окрашивают спирохеты?
СЛАБО ОКРАШИВАЮТСЯ ПО МЕТОДУ ГРАМА, ХОРОШО ОКРАШИВАЮТСЯ МЕТОДАМИ РОМАНОВСКОГО-ГИМЗЫ , ГИМЕНЕСА И ЗДРОДОВСКОГО (КРАСНЫЕ ЧАСТИЦЫ НА ГОЛУБОМ ФОНЕ). РИККЕТСИИ ТАКЖЕ ВОЗМОЖНО ОКРАСИТЬ ПО МЕТОДУ МОРОЗОВА, ОНИ ОКРАШИВАЮТСЯ В ТЕМНО- КОРИЧНЕВЫЙ ИЛИ ЧЕРНЫЙ ЦВЕТ.
Каковы особенности морфологии актиномицетов?
Морфология: палочки или ветвистые клетки, Грам + , имеется несептированный мицелий. Размножение спорами, почкованием, фрагментацией мицелия. Факультативные анаэробы Протео- и липолитическая активность. Высокая устойчивость во внешней среде.
Советы
СОВЕТ №1
Изучите основные характеристики и отличия между спирохетами, риккетсиями, хламидиями, актиномицетами и микоплазмами. Это поможет вам лучше понять их роль в экосистеме и медицине.
СОВЕТ №2
Обратите внимание на методы диагностики и лечения инфекций, вызванных этими микроорганизмами. Знание современных подходов может быть полезно как для медицинских специалистов, так и для широкой аудитории.
СОВЕТ №3
Изучите влияние этих микроорганизмов на здоровье человека и животных. Понимание их патогенности поможет вам осознанно подходить к вопросам профилактики и лечения инфекционных заболеваний.
СОВЕТ №4
Следите за новыми исследованиями и открытиями в области микробиологии, чтобы быть в курсе последних достижений в понимании этих микроорганизмов и их взаимодействия с окружающей средой.