Гибкая, обширная коллекция
Широкое разнообразие микроорганизмов, определяемых с помощью карт для идентификации VITEK2, обуславливает оптимальную гибкость тестирования. Обширная база идентификационных данных обеспечивает точную видовую идентификацию, быстрое получение результатов тестирования и сокращение времени манипуляций* по сравнению с другими системами для идентификации и определения чувствительности к антимикробным препаратам. Ваша лаборатория сможет лучше контролировать расходы, исключить ненужное тестирование и быстро передавать врачам-клиницистам информацию, необходимую для лечения пациентов.
Нажмите на ссылки ниже, чтобы увидеть полный перечень микроорганизмов, которые можно идентифицировать с помощью каждой карты.
Карта для идентификации VITEK 2 GN Идентификация ферментирующих и неферментирующих грамотрицательных бактерий
Карта для идентификации VITEK 2 GPИдентификация грамположительных бактерий
Карта для идентификации VITEK 2 YSTИдентификация дрожжевых грибов и дрожжеподобных микроорганизмов
Карта для идентификации VITEK 2 NHИдентификация Neisseria, Haemophilus и других прихотливых грамотрицательных бактерий
Карта для идентификации VITEK 2 ANCИдентификация анаэробных и коринеформных бактерий
*Примеры источников: Blondel-Hill, et al, Poster D-691, ICAAC, San Francisco, Sep 2006.
Rommler, et al, Poster C-123, ASM Orlando, May 2006.
Идентификация бактерий по ферментативной активности является важным аспектом в микробиологии, который позволяет врачам точно определять патогенные микроорганизмы. Специалисты отмечают, что использование различных тестов на ферментативную активность, таких как определение каталазы, уреазы и оксидазы, значительно ускоряет процесс диагностики. Это особенно актуально в условиях клинической практики, где время играет критическую роль. Врачи подчеркивают, что правильная интерпретация результатов тестов позволяет не только установить диагноз, но и выбрать наиболее эффективное лечение. Кроме того, такая методика способствует мониторингу устойчивости бактерий к антибиотикам, что является важным шагом в борьбе с инфекциями. В целом, использование ферментативной активности в идентификации бактерий считается надежным и эффективным инструментом в арсенале современных медицинских технологий.
Проверка по Граму
Практически при каждом бактериологическом исследовании в микробиологии бактериолог проводит проверку культуры по Граму (так называемое окрашивание по Граму). Это исследование дает возможность выявить наличие в образце грамотрицательных микроорганизмов. Грамотрицательные бактерии имеют особым образом устроенную клеточную стенку, которая состоит из нескольких белковых слоев (белок муреин). Вследствие такого устройства клеточной стенки, в грамотрицательных бактериальных клетках транспорт веществ внутрь клетки и за ее пределы имеет свои специфические черты. Это обстоятельство является важным при изучении биохимической активности грамотрицательных микроорганизмов. Без изначального определения особенностей строения клеточной стенки невозможно правильно подобрать питательную среду для дальнейшего культивирования и изучения грамотрицательных бактерий.
Идентификация по ферментативной активности
В результате изучения ферментативной активности бактерии (синтез определенных ферментов) исследователи могут давать достоверные заключения о принадлежности микроорганизмов к тем или иным биологическим родам, семействам и даже видам. Ферментативная активность исследуется по пяти основным направлениям:
- Изучение изменения уровня кислотности питательной среды.
- Изучение конститутивных ферментов (постоянно синтезируемых в бактериальной клетке). Этот метод позволяет идентифицировать микроорганизмы без создания специализированных условий для их роста. Так, например, производится идентификация на бактерии рода Bacillus, которые требуют особых условий для культивирования, поскольку являются анаэробами (среди представителей рода Bacillus есть также аэробные виды).
- Использование меченых источников углерода.
- Исследование конечных продуктов жизнедеятельности (метаболизма) бактерий в питательной среде.
- Идентификация на бактерии по визуальному выявлению признаков роста колонии (степень помутнения).
Интерпретация результатов проведенных исследований и тестов производится с соблюдением следующих трех принципов:
- Должно быть выявлено и изучено максимальное количество признаков.
- Ни один из признаков не является заведомо более весомым.
- Идентификация результируется как коэффициент соответствия признаков выделенной исследователем культуры свойствам эталонного штамма.
Идентификация бактерий по ферментативной активности является важным методом в микробиологии, который позволяет быстро и точно определить вид микроорганизмов. Многие специалисты отмечают, что этот подход не только упрощает диагностику инфекционных заболеваний, но и способствует более эффективному выбору антибиотиков. Ферменты, вырабатываемые бактериями, могут служить маркерами, указывающими на их метаболические способности и экологические ниши.
Некоторые исследователи подчеркивают, что использование современных технологий, таких как автоматизированные системы и молекулярные методы, значительно повышает точность идентификации. Однако, несмотря на достижения, остаются и вызовы, связанные с интерпретацией результатов и возможными ошибками. В целом, многие согласны, что ферментативная активность бактерий — это мощный инструмент, который продолжает развиваться и открывать новые горизонты в области микробиологии.
Опасность неидентифицированного многообразия
Колоссальное количество неидентифицированных микроорганизмов, которые постоянно окружают человека в быту, может нести потенциальную угрозу для здоровья и даже для жизни. Так, микробиологами было исследовано наличие представителей рода спорообразующих бактерий Bacillus в колбасных и мясных продуктах, которые реализуются с полок магазинов. Как выяснилось, патогенные Bacillus присутствуют во всех видах колбас и в обработанных мясных продуктах:
- В сырокопченых колбасах содержится более миллиарда представителей рода Bacillus на 1 г продукта.
- В фарше также присутствует восьмизначное количество Bacillus, возбудителя сибирской язвы.
- В сосисках и вареных колбасах Bacillus представлен только тысячей КОЕ на 1 г продукта.
- Более всего представителей рода Bacillus было обнаружено в ферментированных колбасах. Исследователи отмечают не только многочисленность бактерий рода Bacillus в этих продуктах, но и видовое разнообразие.
При этом не стоит упускать из виду, что спорообразующие аэробные Bacillus при возникновении благоприятных условий для роста и размножения являются самыми опасными возбудителями инфекционных заболеваний, а при неблагоприятных – образуют термоустойчивые споры и готовы ждать своего часа сколь угодно долго.
Идентификация неферментирующих аэробных грамотрицательных микроорганизмов
Для родов бактерий этого типа (НГОБ) разработаны специализированные тест-системы, позволяющие определить принадлежность микроорганизмов к определенным группам. Определяется присутствие НГОБ по биохимическому составу питательных сред, на которых выращивались исследуемые бактериальные колонии. Особенность неферментирующих микробов состоит в том, что они не разлагают молекулы глюкозы, а используют ее в качестве окислителя (гликолиз). К основным родам неферментирующих бактерий относятся аэробные Pseudomonas, аэробные Acinetobacter, аэробные Burkholderia, аэробные Stenotrophomonas. Идентификация на НГОБ позволяет определить наличие патогенных микроорганизмов в собранных образцах и вовремя предпринять меры по предотвращению распространения инфекции.
Серологическая идентификация
Этот вид распознавания микроорганизмов применяется для идентификации антигенов бактериальной культуры. Серологические исследования проводятся с использованием иммунной диагностической сыворотки, по которой изучаются иммунные реакции исследуемых микроорганизмов:
- агглютинации;
- преципитации;
- нейтрализации;
- с использованием меченых антител.
Реакция агглютинации заключается в констатации выпадения осадка (агглютината), который появляется в результате взаимодействия бактериальной клетки с определенными антителами. Серологическая реакция преципитации заключается в выявлении антигенов, вырабатываемых определенными микробами на антитела, с образованием характерного мелкозернистого осадка.
Популярные статьи на тему: неферментирующие грамотрицательные бактерии
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Дифференцированное применение карбапенемов
Карбапенемы – антибиотики сверхширокого спектра действия, проявляющие активность в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов – как аэробных, так и анаэробных.
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Спирамицин: вторая молодость макролидного антибиотика
Макролидные антибиотики около 50 лет применяются в клинической практике. Первый препарат этого класса – эритромицин – был внедрен в практику в 1952 г., спустя три года появился еще один препарат – спирамицин (Ровамицин).
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Конгресс «Лекарства и жизнь» Роль защищенных пенициллинов в терапии пневмоний и инфекционных обострений хронического бронхита
Неспецифические заболевания органов дыхания по таким показателям, как распространенность, смертность, экономические затраты занимают ведущее место в общей структуре заболеваемости населения большинства стран мира.В 2002 г. в Украине…
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Дифференцированное применение карбапенемов
На протяжении десятилетий доминирующей схемой применения антибиотиков у тяжелых больных была так называемая восходящая: если не «работали» препараты первого ряда, назначали антибиотики более «мощные» (второго ряда).
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Дифференцированное применение карбапенемов
Карбапенемы – антибиотики сверхширокого спектра действия, проявляющие активность в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов – как аэробных, так и анаэробных.
Читать дальше
Инфекционные заболевания
Влияние азитромицина* на нормальную микрофлору ротовой полости и кишечника
В статье приведены результаты двойного слепого контролируемого плацебо исследования по оценке влияния трехдневного курса азитромицина и семидневного курса кларитромицина на нормальную микрофлору ротовой полости и кишечника у здоровых…
Читать дальше
Пульмонология, фтизиатрия
Клинически значимые возбудители инфекций дыхательных путей
Конспект врача-клинициста и микробиолога
Часть 4. «Проблемные» грамнегативные микроорганизмы: синегнойная палочка и ацинетобактер
Имеется ряд микроорганизмов, которые ввиду высокого уровня приобретенной резистентности принято называть проблемными. К таковым среди возбудителей заболеваний органов дыхания относятся метициллинрезистентные золотистые стафилококки.
Стадии идентификации
Несмотря на вековую историю изучения микроорганизмов, микробиология и сегодня испытывает сложности в изучении бактерий. Причина тому – микроскопические размеры самих организмов и продуктов их жизнедеятельности. Трудности присутствуют на всех стадиях. Всего основных стадий пять:
- Выделение чистой культуры.
- Приготовление суспензии и инокуляция лунок.
- Инкубационный период.
- Фиксация результатов.
- Выводы и интерпретация результатов.
Порядок реализации каждой стадии зависит от того, идентификация на какие бактерии должна быть выполнена исследователем (аэробные, неферментирующие, грамотрицательные и т.д.).
Acinetobacter spp.
Занимают второе после P. aeruginosa место по клиническому значению среди неферментирующих микроорганизмов. Межвидовая дифференцировка (A. baumannii, A. lwoffii, A. haemoliticus и др.) внутри рода может быть затруднена
Ацинетобактеры широко распространены в природе и, что особенно важно, в стационарах, особенно хирургического профиля, в отделениях реанимации и интенсивной терапии. Микроорганизмы сохраняют жизнеспособность во многих растворах, на сухих и влажных поверхностях оборудования и достаточно быстро колонизуют кожные покровы и слизистые оболочки пациентов.
Для здоровых людей ацинетобактеры практически непатогенны, однако в отделениях интенсивной терапии и реанимации могут способствовать развитию тяжелых инфекций
Наиболее часто микроорганизмы вызывают респиратор-ассоциированные пневмонии, доказана их роль и в этиологии госпитальных инфекций другой локализации (инфекции мочевыводящих путей, менингиты, эндокардиты, остеомиелиты, перитониты и др.). Описаны вспышки госпитальных инфекций, вызванных ацинетобактерами.
При выделении ацинетобактеров требуется тщательная оценка их клинической значимости и дифференцировка инфекции от колонизации.
Ацинетобактеры характеризуются высоким уровнем природной чувствительности к большинству антибиотиков, однако их характерной особенностью является быстрое формирование приобретенной устойчивости к антибактериальным препаратам многих групп. Госпитальные штаммы ацинетобактеров, как правило, полирезистентны.
Резистентность микробов к различным факторам окружающей среды
Резистентность микробов к различным факторам окружающей среды используется при И. м., т. к. в ряде случаев микробы значительно отличаются по этому признаку. Так, напр., неспороносные бактерии и вегетативные формы спороносных бактерий чувствительны к температуре и к малым концентрациям антисептиков. Они погибают при t° 60° в течение получаса и в 1% р-ре фенола в пределах 1 часа. Кислотоустойчивые бактерии чувствительны к температуре, но относительно резистентны к дезинфекционным средствам; они погибают при t° 60° в течение получаса, но на холоду противостоят антисептикам часто в течение нескольких часов. Особо высокой устойчивостью обладают споры бактерий (см. Споры, бактерий). Они погибают либо от пара под давлением (при t° 120° в течение получаса) или от высоких концентраций антисептиков, напр, под воздействием 5% фенола в течение нескольких часов. Поэтому при подозрении на образование микробом спор ставят пробы на резистентность к температуре.
Для определенных видов бактерий показательна их устойчивость к нек-рым антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам. Так, напр., одним из тестов, позволяющих дифференцировать классический холерный вибрион от вибриона Эль-Тор, а также Proteus mirabilis от других кишечных бактерий, служит способность вибриона Эль-Тор и Proteus mirabilis расти в присутствии полимиксина В (50 ед. в 1 мл и выше).
Методы проведения исследований по распознаванию микробов
Метод познания того или иного предмета представляет собой комплекс мер по решению определенной задачи. Методы идентификации различных микроорганизмов разрабатывались микробиологами и бактериологами на протяжении многих лет, и сегодня эти методы активно используются в науке, медицине, фармацевтике и даже в промышленном производстве (в том числе и продуктов питания). Основными методами распознавания бактерий являются:
- метод прямого прижизненного окрашивания различных проб воды, почв и осадков;
- прямые методы оценки метаболической активности клетки;
- метод молекулярного анализа;
- метод обратной транскрипции.
Перечисленные методы представляют собой основу для исследователей и являются базисом для большого количества методик, которые позволяют определять такие свойства бактерий, как:
- морфологические (особенности и индивидуальные свойства строения клеток);
- культуральные свойства (питание, дыхание, условия для роста бактериальной культуры);
- ферментативные (биохимические свойства, связанные со способностью бактериальной культуры расщеплять сахара, белки, разрушать эритроциты);
- антигенные (свойства, связанные с особенностями антигенов чистой бактериальной культуры).
Установление специфических свойств дает возможность исследователю составить максимально полное представление о выделенной культуре бактерий.
Определение свойств микроорганизмов
Общих схем И. м., применяемых в практике, не существует. Для каждой группы микроорганизмов идентификация осуществляется на основе их биол, особенностей
Так, для идентификации вирусов (см.) важное значение имеют виды клеточных культур, в которых происходит их размножение, характер цитопатического действия, образование включений, антигенная структура, в некоторых случаях морфология вирусов, а также патогенность вирусов для экспериментальных животных .
В идентификации риккетсий (см.) значение имеют изучение их морфологических свойств, особенностей внутриклеточного паразитизма, антигенных свойств и т. д. При идентификации представителей грибков, актиномицетов и простейших значение имеют морфол, особенности возбудителя (см. Актиномицеты, Грибки паразитические, Простейшие). Основными признаками в идентификации микоплазм являются их морфол., культуральные и антигенные свойства (см. Mycoplasmataceae). Бактерии идентифицируют на основе комплексного изучения их морфол., тинкториальных, культуральных, биохим., антигенных, фаголизабельных, бактериоциногенных и патогенных свойств.
Заслуживает внимания предложение некоторых исследователей использовать в качестве исходного пункта идентификации бактерий окраску по Граму. На первой стадии дифференцирования грамположительных бактерий авторы учитывают форму клетки, кислотоустойчивость, спорообразование, подвижность, продукцию каталазы, оксидазы, отношение к глюкозе, а грамотрицательных бактерий — форму клетки, подвижность, продукцию каталазы, оксидазы и отношение к глюкозе. На последующих стадиях исследования, пользуясь таблицами, характеризующими бактерии, относящихся к определенному роду, находят ключ к определению видов, подвидов и типов.
Вопрос-ответ
Какие основные ферменты используются для идентификации бактерий?
При идентификации бактерий часто используются ферменты, такие как каталаза, уреаза, оксидаза и различные протеазы. Эти ферменты помогают определить метаболические пути и характеристики бактерий, что позволяет сузить круг возможных идентификаций.
Как ферментативная активность бактерий влияет на их патогенность?
Ферментативная активность может существенно влиять на патогенность бактерий. Например, наличие уреазы у некоторых патогенных штаммов Helicobacter pylori позволяет им выживать в кислой среде желудка, что способствует развитию язв. Анализ ферментативной активности помогает понять механизмы патогенности и разработать методы лечения.
Как проводится тестирование на ферментативную активность?
Тестирование на ферментативную активность обычно проводится с использованием специальных сред, содержащих субстраты для определенных ферментов. Бактерии инокулируются в такие среды, и наблюдается изменение цвета или образование осадка, что указывает на наличие или отсутствие активности конкретного фермента.
Советы
СОВЕТ №1
Изучите основные ферменты, которые могут быть использованы для идентификации бактерий. Знание о том, какие ферменты характерны для различных групп бактерий, поможет вам быстрее и точнее определить вид микроорганизма.
СОВЕТ №2
Проводите тесты на ферментативную активность в контролируемых условиях. Обеспечение стабильной температуры и pH среды может существенно повлиять на результаты, поэтому старайтесь минимизировать внешние факторы.
СОВЕТ №3
Используйте контрольные образцы для сравнения. Наличие стандартных штаммов бактерий с известной ферментативной активностью поможет вам валидации ваших результатов и повысит точность идентификации.
СОВЕТ №4
Документируйте все результаты и наблюдения. Ведение подробного журнала о проведенных тестах и их результатах позволит вам отслеживать закономерности и улучшать методику идентификации в будущем.